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通蔚生物胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒樣本的前處理

日期:2024-07-12 12:44
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摘要:上海通蔚生物胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒樣本的前處理 測定方法: 微量法 測定規格: 100管/96樣 保存條件: 低溫避光保存 有 效 期: 6個(gè)月 注 意: 正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預期差異較大的樣本做預測定 測定意義: ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養細胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時(shí)還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來(lái)源,在逆境中該酶活性通常會(huì )發(fā)生顯著(zhù)變化。 測定原理: 利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應,在340 nm下測定NADPH濃度的...
上海通蔚生物胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒樣本的前處理
胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒
測定方法: 微量法
測定規格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注    意: 正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養細胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時(shí)還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來(lái)源,在逆境中該酶活性通常會(huì )發(fā)生顯著(zhù)變化。
測定原理:
利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應,在340 nm下測定NADPH濃度的增加。
所需的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣本的前處理:
1、細胞或組織樣品的制備:
培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
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